質(zhì)譜MS
我們這里所說的質(zhì)譜指的是一級質(zhì)譜,多肽質(zhì)譜鑒定指的就是利用質(zhì)譜法對多肽進(jìn)行鑒定。多肽質(zhì)譜鑒定主要是鑒定多肽的一級結(jié)構(gòu),通過檢測多肽的氨基酸序列信息獲取多肽的序列或翻譯后修飾信息。多肽鑒定常用串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行。從代測樣品中提取出多肽以后,先用色譜法分離,然后離子源將分離后的多肽進(jìn)行離子化,之后一級質(zhì)譜檢測完整多肽離子的質(zhì)荷比,肽庫生物科技提供基于質(zhì)譜的多肽鑒定服務(wù)。
高效液相色譜HPLC
高效液相色譜 ( HPLC) 的出現(xiàn)不僅是藥物研發(fā)領(lǐng)域的革命, 同時也為多肽類物質(zhì)的分離提供了更有利的方法。在適宜的色譜條件下應(yīng)用 HPLC可以在短時間內(nèi)完成對蛋白質(zhì)、多肽的分離, 更重要的是 HPLC能在制備規(guī) 模上生產(chǎn)具有生物活性的多肽。在多肽的分離、純化和鑒定中應(yīng)用最多的是反相高效液相色譜 (RP-HPLC),約95%是C18反相硅膠HPLC。其原理是基于多肽的疏水性,在不同介質(zhì)條件下,使不同的多肽得以分離,具有快速、高效和高回收的特點,在分離和制備多肽及蛋白質(zhì)上有獨特的優(yōu)越性。
肽庫生物整個工藝中會有三次HPLC確認(rèn),切割之后會進(jìn)行MS和HPLC分析,制備之后會再次檢測HPLC交付QC檢測中心,經(jīng)過再次MS確認(rèn)后凍干,凍干之后,在發(fā)貨之前會進(jìn)行最后一次檢測,并提供檢測報告,如下: