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生物素標記

    生物素標記


    生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期應用于免疫學,并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應放大系統(tǒng)。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級放大效應,并與熒光素、酶、同位素等免疫標記技術有機地結合,使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進一步提高。主要有用于標記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS最常用,當然,也可以直接使用生物素也可以標記,因為其結構上有個游離的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。

    此外生物素是復合維生素B2的組成部分。它與雞清蛋白、親和素、真菌蛋白、鏈霉親和素均有較高親和性和結合力。親和素和 鏈霉親和素都是四聚體蛋白,可緊緊地結合四分子D-biotin,其結合力是已知自然界中最強的非共價作用。生物素與親和素之間的相互作用可用于蛋白純化、檢測、固化、藥物導向和蛋白質結構分析等方面。多肽生物素標記常在肽的N端或Lys側鏈;肽鏈 C端也可用Biotin標記,此時肽鏈C端需引入Lys或者乙二胺結構。




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