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多肽固相合成的基礎條件和新手常犯的三個錯誤
瀏覽量:36 | 2024/2/26 14:54:43
多肽固相合成的基礎條件介紹

固相合成發(fā)展至今,其工藝相對成熟,對于大多數(shù)多肽合成來說產(chǎn)量較為穩(wěn)定,收率較高,但若要進行固相合成,也需要滿足一些條件:

1)通常將多肽一末端鍵合到固相載體上,以使肽鏈延長;

2)對暫不參與形成化學鍵的基團加以保護反應完成后再脫除保護基;

3)對參與形成酰胺鍵的羧基必須進行活化。

4)用適合的試劑將目的標從載體上切割下來。

其中載體的選擇關系到反應溶劑的選擇,關系著切割后多肽末端帶有何種基團,他關系到溶劑的擴散速度,影響固相接肽反應的速度和合成量等問題,是重點考慮的方面,保護基的選擇關系到產(chǎn)物的得率與純度,a氨基的保護基要能在溫和條件下除去,同時過程中不能除去側(cè)鏈上的保護基,而側(cè)鏈上的保護基需要在目的肽全合成后脫去,尋找新型的保護基也是固相合成的重要部分。


縮合劑的選擇也十分關鍵,直接影響到成酰胺鍵的速度,以及消旋化的問題等一些副反應的發(fā)生。選擇一種好的縮合劑體系可以縮短合成時間,提高合成肽純度,確保合成肽的活性。

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新手常犯的三個錯誤

一:合成時間越長越好

多肽合成的效率經(jīng)過多年的摸索和優(yōu)化,每一步的合成效率在短時間內(nèi)都能達到99%以上,過長的反應時間對正面的反應產(chǎn)率提高非常有限,卻大大增加了副反應發(fā)生的機率,所以過長的反應時間并不好。

二:氨基酸的側(cè)鏈保護都一樣

帶有活潑側(cè)鏈的氨基酸在合成中需要保護,根據(jù)側(cè)鏈的不同,保護基也有不同的選擇。選擇適當?shù)谋Wo基可以有效地減少合成的難度。

三:萬能的切肽試劑

大部分的多肽都可以用一套切肽試劑的組合從樹脂上切下來,而對于有特殊側(cè)鏈保護的氨基酸,往往需要調(diào)整這種組合,而對于沒有側(cè)鏈保護的多肽序列,是需要加入98%TFA和2%水的溶液就可以完成,要靈活運用切肽試劑的組合。
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